Abstract Objectives: mesenchymal stem cells (MSC) are characterized by their anti-inflammatory, immunosuppressive activity, and their ability to differentiate. This makes them an interesting therapeutic tool in cell therapy and regenerative medicine. In part, the therapeutic effect of MSC is mediated by the secretion of extracellular vesicles (EV). The preconditioning of MSC in hypoxia can enhance the regenerative capacity of the secreted EV. In this context, the aim of the study was to evaluate whether EV derived from human MSC cultured in normoxic and hypoxic conditions affect the osteoblastogenesis and adipogenesis of MSC. Material and methods: EV were isolated from MSC maintained for 48 hours in normoxic or hypoxic conditions (3 % O2) using ultrafiltration and size exclusion chromatography. The EV were characterized by Western blot, electron microscopy, and nanoparticle tracking analysis. In MSC cultures, the effect of the EV on viability was evaluated using an MTT assay, migration was assessed with the Oris assay while differentiation into osteoblasts and adipocytes was also studied. Results: the EV increased viability and migration, but no differences were seen between those derived from normoxic and hypoxic culture conditions. The EV, mainly those derived from hypoxia, increased both mineralization, and the expression of osteoblastic genes. However, they did not affect adipogenesis significantly. Conclusions: the EV derived from MSC in hypoxia do not affect adipogenesis but have a greater ability to induce osteoblastogenesis. Therefore, they could potentially be used in bone regeneration therapies and treatments for bone conditions like osteoporosis.

Resumen Objetivos: las células madre mesenquimales (MSC) se caracterizan por su actividad antiinflamatoria, inmunosupresora y su capacidad de diferenciación. Esto las convierten en una interesante herramienta terapéutica en terapia celular y medicina regenerativa. En parte, el efecto terapéutico de las MSC, está mediado por la secreción de vesículas extracelulares (EV). El precondicionamiento en hipoxia de las MSC puede mejorar la capacidad regenerativa de las EV secretadas. En este contexto, el objetivo del estudio ha sido evaluar si EV derivadas de MSC humanas cultivadas en hipoxia y normoxia afectan a la osteoblastogénesis y adipogénesis de las MSC. Material y métodos: se aislaron EV de MSC mantenidas 48 h en normoxia o hipoxia (3 % O2) mediante ultrafiltración y cromatografía de exclusión por tamaño. Las EV fueron caracterizadas por “Western blot”, microscopía electrónica y análisis de seguimiento de nanopartículas. En cultivos de MSC se evaluó el efecto de las EV sobre la viabilidad por ensayo con MTT, la migración por “Oris assay” y la diferenciación a osteoblastos y adipocitos. Resultados: las EV aumentaron la viabilidad y migración, pero no hubo diferencias entre las derivadas de normoxia e hipoxia. Las EV, principalmente las derivadas de hipoxia, aumentaron la mineralización y la expresión de genes osteoblásticos. Sin embargo, no afectaron significativamente a la adipogénesis. Conclusiones: las EV derivadas de MSC en hipoxia no afectan a la adipogénesis, pero tienen una mayor capacidad de inducir la osteoblastogénesis. Por lo tanto, podrían potencialmente ser utilizadas en terapias de regeneración ósea y tratamientos de patologías óseas como la osteoporosis.

RESUMO Introdução: O tradicional programa de treinamento em hipóxia utilizado pelos atletas de endurance foi incluído no treinamento dos jogadores de esportes coletivos e/ou de raquete. Objetivo: O objetivo do presente estudo consiste em analisar o efeito de uma nova dose menor de treinamento de sprints repetidos em hipóxia (SRH), em comparação com estudos anteriores sobre o desempenho físico de curto e longo prazo dos jogadores de esportes coletivos. Métodos: Os testes foram realizados antes e após quatro semanas de treinamento específico supervisionado e após duas semanas de destreinamento. Vinte e quatro jogadores de esporte coletivo participaram voluntariamente no estudo (idade: 22,73±2,87 anos; peso: 70,20±3,42 kg; estatura: 176,95±1,63 cm; IMC: 22,42 ±2,26 kg/m2); os participantes foram aleatoriamente designados para o grupo de treinamento SRH (n=8; FiO2=14,6%) ou para o grupo de normóxia (SRN) (n=8; FiO2=20,9%) ou para um terceiro grupo controle (CON) (n=8). Os participantes realizaram oito sessões de treinamento de duas séries de cinco sprints repetidos de 10 segundos com período de recuperação de 20 segundos entre os sprints e de 10 minutos a 120 W entre as séries. A composição corporal foi medida seguindo os procedimentos padrão de avaliação antropométrica. Para avaliar os desfechos aeróbicos e anaeróbicos, os testes de Wingate, teste de habilidade de sprints repetidos, SJ, CMJ e Yo-Yo teste de recuperação intermitente foram utilizados. Resultados: No grupo hipóxia, a potência máxima aumentou em 14,96% e o número total de sprints realizado aumentou em 20,36%, ambos apresentaram grande tamanho de efeito (ES = 0,78 e ES = 0,71, respectivamente). Conclusão: Uma dose menor de treinamento de sprints repetidos em hipóxia leva a melhorias na potência máxima e no número de sprints no grupo hipóxia em jogadores de esportes coletivos, conforme demonstrado através do grande tamanho de efeito em ambos os casos. Nível de evidência II; Estudo prospectivo comparativo.

ABSTRACT Introduction: The traditional hypoxic training program used by endurance athletes was included in the training of team and/or racquet sports players. Objective: The aim of this study is to analyse the effect of a new lower dose of repeated-sprint training in hypoxia (RSH) as compared with previous studies on short and long-term physical performance of team sports players. Methods: Tests were performed before and after four weeks of supervised specific training and after two weeks of detraining. Twenty-four team-sport players voluntarily participated in the study (age: 22.73±2.87 years; weight: 70.20±3.42 kg; height: 176.95±1.63 cm; BMI: 22.42±2.26 kg/m2); the participants were randomly assigned to the RSH training group (n=8; FiO2= 14.6%), to the normoxia group (RSN) (n=8; FiO2= 20.9%) or to a third control group (CON) (n=8). The participants performed eight training sessions of two sets of five 10-second repeated sprints, with a recovery period of 20 seconds between sprints and a recovery period of 10 minutes at 120 W between sets. Body composition was measured following standard anthropometric evaluation procedures. The Wingate Test, Repeated-Sprint Ability Test, SJ, CMJ and Yo-Yo Intermittent Recovery Test were used to evaluate aerobic and anaerobic outcomes. Results: In the hypoxia group, maximal power increased by 14.96% and the total number of sprints performed increased by 20.36%, both with a large effect size (ES=0.78 and ES = 0.71, respectively). Conclusion: A lower dose of repeated-sprint training in hypoxia produces improvements in maximal power and number of sprints in the hypoxia group, in team sports players, as shown by the large effect size in both cases. Level of evidence II; Comparative prospective study.

RESUMEN Introducción: El tradicional programa de entrenamiento en hipoxia utilizado por los atletas de endurance fue incluido en el entrenamiento de los jugadores de deportes colectivos y/o de raqueta. Objetivo: El objetivo del presente estudio consiste en analizar el efecto de una nueva dosis menor de entrenamiento de sprints repetidos en hipoxia (SRH), en comparación con estudios anteriores sobre el desempeño físico de corto y largo plazo de los jugadores de deportes colectivos. Métodos: Los tests fueron realizados antes y después de cuatro semanas de entrenamiento específico supervisado y después de dos semanas de desentrenamiento. Veinticuatro jugadores de deporte colectivo participaron voluntariamente en el estudio (edad: 22,73±2,87 años; peso: 70,20±3,42 kg; estatura: 176,95±1,63 cm; IMC: 22,42 ±2,26 kg/m2); los participantes fueron aleatoriamente designados para el grupo de entrenamiento SRH (n=8; FiO2=14,6%) o para el grupo de normoxia (SRN) (n=8; FiO2=20,9%) o para un tercer grupo control (CON) (n=8). Los participantes realizaron ocho sesiones de entrenamiento de dos series de cinco sprints repetidos de 10 segundos con período de recuperación de 20 segundos entre los sprints y de 10 minutos a 120 W entre las series. La composición corporal fue medida siguiendo los procedimientos estándar de evaluación antropométrica. Para evaluar los resultados aeróbicos y anaeróbicos, fueron utilizados los tests de Wingate, test de habilidad de sprints repetidos, SJ, CMJ y Yo-Yo test de recuperación intermitente. Resultados: En el grupo hipoxia, la potencia máxima aumentó en 14,96% y el número total de sprints realizado aumentó en 20,36%, ambos presentaron gran tamaño de efecto (ES = 0,78 y ES = 0,71, respectivamente). Conclusión: Una dosis menor de entrenamiento de sprints repetidos en hipoxia lleva a mejoras en la potencia máxima y en el número de sprints en el grupo hipoxia en jugadores de deportes colectivos, conforme fuera demostrado a través del gran tamaño de efecto en ambos casos. Nivel de evidencia II; Estudio prospectivo comparativo.

ABSTRACT Background: Childhood and adolescence are key to the development of chronic disease stages, the distribution of fat an important factor in this regard. The aim of the study was to evaluate the effects on fat parameters of a high intensity program developed in adolescents during physical education classes. Methods: In 2013, 35 school-age children of Cáceres taken part in this study divided into two groups. The high-intensity group performed for 8 weeks, 4-6 sets of 20 seconds at maximal intensity with a ratio effort / recovery of 1: 3 to 1: 1. The other group, developed continuous aerobic exercise during the same time. It conducted an assessment of fat mass before and after the training program. Repeated measures ANOVA test was used to observe that there were no statistically significant differences. Results: Continuous aerobic training group showed statistically significant differences in intra-group analysis in the percentage of fat mass trunk (Pre: 15.66 ± 4.16 vs Post: 16.95 ± 4.03; +1, 29%; p = 0.04) and the percentage of total fat (Pre: 21.58 ± 3.93 / Post: 22.34 ± 3.70; p = 0.05). Statistically significant differences were not found in the analysis between-groups in any of the studied variables. Conclusions: The training program high intensity physical activity at school carried out during physical education classes did not improve fat mass parameters evaluated. However, maintaining these parameters could be a good result during the development of this stage, where an increase of these occurs.

RESUMEN Fundamentos: La infancia y la adolescencia son etapas claves para el desarrollo de enfermedades crónicas, siendo la distribución de grasa un importante factor en este sentido. El objetivo del estudio fue evaluar los efectos sobre parámetros de grasa de un programa de alta intensidad desarrollado en adolescentes durante las clases de educación física. Métodos: Durante el año 2013, 35 escolares cacereños participaron en el estudio divididos en dos grupos. El grupo de alta intensidad realizó durante 8 semanas de 4 a 6 series de sprints de 20 segundos a máxima intensidad con una relación esfuerzo/recuperación de 1:3 a 1:1. El otro grupo desarrolló ejercicio aeróbico continuo durante el mismo tiempo. Se llevó a cabo una evaluación de la masa grasa antes y tras el programa de entrenamiento. El test ANOVA de medidas repetidas se usó para analizar si existían diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos. Resultados: El grupo de entrenamiento aeróbico continuo mostró diferencias estadísticamente significativas en el análisis intra-grupo en el porcentaje de masa grasa del tronco (Pre:15,66±4,16 vs Post:16,95±4,03; +1,29%; p=0,04) y el porcentaje de grasa total (Pre:21,58±3,93/Post:22,34±3,70; p=0,05). Conclusiones: El programa de entrenamiento de actividad física de alta intensidad en la escuela llevado a cabo durante las clases de Educación Física no mejoró los parámetros de masa grasa evaluados. Sin embargo, el mantenimiento de estos parámetros podría ser un buen resultado durante el desarrollo de esta etapa, donde se produce un incremento.